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超聲波細胞粉碎機之實驗室組織細胞的破碎方法

來源:南京AG环亚备用网址儀器   發布時間:2018-09-27 19:20:07   點擊率:177

超聲波細胞粉碎機之實驗室組織細胞的破碎方法


超聲波細胞粉碎機也叫超聲波破碎儀、超聲波乳化機。是一種利用超聲波在液體中產生空化效應的多功能、多用途儀器;它能用于多種細胞、細菌、病毒及動植物組織的破碎,同時可用來乳化、分離、勻化、提取、消泡、清洗、納米材料的制備、分散及加速化學反應等。

實驗室對組織細胞的破碎方法很多,有機械方法、物理方法、化學方法和生物化學方法等。

环亚视讯超聲波細胞粉碎機在破碎前,材料常需要預處理,如動物材料要除去與實驗無關甚至有妨礙的結締組織,脂肪組織和血污等,植物種子需要除殼,微生物材料需將菌體和發酵液成分分開等。不同實驗規模、不同實驗材料和實驗要求,使用的破碎方法和條件也不同。


ATPIO機械法

环亚视讯主要通過機械切力的作用使組織細胞破碎的方法,常用的器械有組織搗碎機、勻漿器、研缽和研磨、壓榨器等。

环亚视讯1)組織搗碎機 一般用于動物組織、植物肉質種子、柔嫩的葉芽等,轉速可高達10000rpm/M以上。由于旋轉刀片的機械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用。

环亚视讯2)勻漿器 勻漿器的研缽磨球和玻璃管內壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離,破碎細胞的程度比組織搗碎機高。制作勻漿器的材料,除玻璃外,還可以用硬質塑料、不銹鋼、人造熒光樹脂等。

3)研缽 多用于細菌或其他堅硬植物材料,研磨時常加入少量石英砂,玻璃粉或其他研磨劑,以提高研磨效果。

4)細菌磨 是一種改良了的研磨器,比研缽具有更大的研磨面積,而且低部有出口。操作時先把細菌和研磨粉調成糊狀,每次加入一小勺,研磨20-30秒即可將細菌細胞完全磨碎。


ATPIO物理法

主要通過各種物理因素使組織細胞破碎的方法。

1)反復凍溶法 先將樣品深冷至-15---20度使之凍固,再緩慢的融化,反復多次,多用于動物性材料。

2)急熱驟冷法 將材料投入沸水中,維持85-90分鐘,至水浴中急速冷卻,此法可用于細菌及病毒材料。

环亚视讯3)超聲波處理 頻率一般選在10KC至200KC,功率200-500瓦范圍,處理時間有數分鐘至數十分鐘不等,處理過程中注意冷卻。此法多用于微生物材料。


ATPIO化學及生物化學法

有自溶法,酶解法和表面活性劑法等。

1)自溶法 在一定PH和適當的溫度下,利用組織細胞內自身的酶系統將細胞破碎的方法。此過程需較長時間,常用少量防腐劑如甲苯等防止細胞的污染。

2)酶溶法 利用各種水解酶,如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶、半纖維素酶、脂酶等,將細胞壁分解,使細胞內含物釋放出來。有些細菌對溶菌酶不敏感,加入少量巰基試劑或8摩爾尿素處理后,使之轉為對溶菌酶敏感而溶解。

3)表面活性劑處理 如十二烷基硫酸鈉、氯化十二烷基吡啶等。